产品货号：
YT403
中文名称：
T4 DNA聚合酶
英文名称：
T4 DNA Polymerase
产品规格：
50U
发货周期：
1～3天
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T4 DNA聚合酶是一种模板依赖的DNA聚合酶，可以在结合有引物的单链DNA模板上，从5'→3'方向催化DNA合成反应。T4 DNA聚合酶具有3'→5'外切酶活性，但不具有5'→3'外切酶活性。
T4 DNA聚合酶由于同时具有5'→3'DNA聚合酶活性和3'→5'DNA外切酶活性，可以用于将5'端突出末端补平或3'端突出末端削平。T4 DNA聚合酶的3'→5'DNA外切酶活性对于单链DNA要比双链DNA活性更高，即单链DNA要比双链DNA中的非配对链部分更容易被T4 DNA聚合酶所消化。T4 DNA聚合酶的3'→5'外切酶活性比Klenow Fragment要高约200倍。
T4 DNA Polymerase可用于催化以下反应：DNA 5'或3'突出末端的平滑化；通过置换反应进行标记DNA探针合成；定点突变过程中第二链的合成；不依赖于连接反应的PCR产物克隆。
本产品由大肠杆菌表达，表达基因的来源为T4嗜菌体。
| 组分 | 规格 |
| T4 DNA Polymerase(5U/μL) | 10μL |
| 5×Reaction Buffer | 300μL |
保存：-20℃
20mM potassium phosphate(pH7.5)，200mM KCl，2mM DTT，and 50% glycerol。
5×Reaction Buffer：
335mM Tris-HCl(pH8.8 at 25℃)，33mM MgCl2，5mM DTT，84mM (NH4)2SO4。
37℃30分钟时间内，催化10nmol脱氧核糖核苷酸(dNTPs)摻入到多聚核苷酸中所需的酶量定义为1个活性单位。
67mM Tris-HCl(pH8.8)，6.7mM MgCl2，1mM DTT，16.7mM (NH4)2SO4，0.2mg/ml BSA，0.033mM of each dNTP，0.4MBq/ml[3H]-dTTP，0.2mM热变性且经DNA酶部分消化过的小牛胸腺DNA。
不含DNA内切酶，不含RNase。
70℃加热10分钟可使T4 DNA聚合酶失活。金属离子螯合剂可以抑制T4 DNA聚合酶的活性。
一、DNA 5'或3'突出末端平滑化
- 参考如下表格设置反应体系：
成分 用量 5×Reaction Buffer 4μL digested DNA 1μg dNTP Mixture(2.5mM each) 0.8μL 补充无核酸酶的去离子水 至19.8μL T4 DNA Polymerase(5U/μl) 0.2μL - 按上表设置好反应体系后，轻轻混匀(可以用移液器吹打混匀或用Vortex在最低速度轻轻混匀)，随后离心沉淀液体。
- 11℃孵育20分钟，或室温(20～25℃)孵育5分钟。
- 70℃孵育10分钟终止反应。
二、其他用途
请自行参考T4 DNA Polymerase的相关文献资料进行。
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